簡(jiǎn)要描述:QIAGEN 試劑盒 exoEasy Maxi Kit從血漿、血清及細胞培養上清中純化外泌小體及其他細胞外囊泡(EV)可分離獲得完整的exosome及其他細胞外囊泡適用于功能性檢測及物理和生化分析
產(chǎn)品分類(lèi)
Product Category詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | 76064 |
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供貨周期 | 現貨 | 主要用途 | 從血漿、血清及細胞培養上清中純化外泌小體及其他細胞外囊泡(EV) |
應用領(lǐng)域 | 醫療衛生,環(huán)保,食品,生物產(chǎn)業(yè),農業(yè) |
QIAGEN 試劑盒 exoEasy Maxi Kit
從血漿、血清及細胞培養上清中純化外泌小體及其他細胞外囊泡(EV)
可分離獲得完整的exosome及其他細胞外囊泡
適用于功能性檢測及物理和生化分析
可在25分鐘內純化獲得exosome及其他細胞外囊泡
可通過(guò)簡(jiǎn)單的離心柱實(shí)驗方案平行處理多個(gè)樣品
可提取高達4 ml的血漿或血清,或者32 ml的細胞培養上清
exoEasy Maxi Kit使用了膜親和離心柱來(lái)高效地從血漿、血清、細胞培養上清及其他生物液體中提取獲得exosome及其他細胞外囊泡。Maxi規格的離心柱可允許處理大體積的樣品,包括高達4 ml的血漿或血清,或者32 ml的細胞培養上清。實(shí)驗流程非??焖僖恢?,非常適用于提取EV進(jìn)行exosome及其他細胞外囊泡的功能性分析。
Cat No./ID: 76064 exoEasy Maxi Kit (20) For 20 vesicle preps: 20 exoEasy Maxi Spin Columns, Collection Tubes (50 ml), Reagents and Buffers |
Cat No./ID: 76204 Buffer XBP (250 ml) 250 ml Binding Buffer |
exoEasy Maxi Kit適用于分子生物學(xué)應用。該產(chǎn)品不適用于疾病的診斷、預防或治療。
用于純化外泌小體及其他細胞外囊泡的exoEasy實(shí)驗方案不僅比超速離心更加快捷,而且可獲得更潔凈的純化產(chǎn)物。掃描電子顯微鏡顯示兩種技術(shù)均可提供完整的預期尺寸的囊泡,不過(guò)通過(guò)超速離心法制得的樣品中還含有一些并不符合EV尺寸或外形的更小的結構。
QIAGEN 試劑盒 exoEasy Maxi Kit
提取獲得的囊泡具有完整的功能,可用于多種下游應用,包括細胞培養等工作。洗脫的囊泡的性質(zhì)和數量可通過(guò)多種不同的方法進(jìn)行測定。其中包括電子顯微鏡、物理特征描述(例如,納米顆粒追蹤分析(NTA),或可調電阻脈沖感應(TRPS))、微粒分子成分分析(例如蛋白質(zhì)、核酸或脂類(lèi))等。由于如NTA或TRPS等微粒計數方法無(wú)法將囊泡與其他懸浮顆粒區分開(kāi),使用未經(jīng)處理的生物液體或仍含有其他顆粒物(例如,蛋白復合物)的粗制備樣品進(jìn)行顆粒計數可能會(huì )明顯地高估囊泡數目。
Principle
exoEasy Kit在傳統的超速離心exosome或微泡提取方法的基礎上進(jìn)行了改進(jìn),可在25分鐘內獲得純化的細胞外囊泡。
exoEasy Maxi Kit使用了膜親和結合步驟來(lái)從血漿、及血清或細胞培養上清中分離exosome及其他EV。這種方法無(wú)法通過(guò)大小或細胞來(lái)源對EV進(jìn)行區分,也不依賴(lài)于是否存在微粒表位。它運用了囊泡的通用生化特性來(lái)提取樣品中的所有細胞外囊泡(參見(jiàn)圖片使用NTA對由exoEasy Maxi Kit提取獲得的細胞外囊泡進(jìn)行性質(zhì)分析)。因此,必須*去除細胞、細胞碎片、凋亡小體等組分,可在開(kāi)始提取步驟前對樣品進(jìn)行離心或過(guò)濾等操作。
Exosome Diagnostics, Inc.開(kāi)發(fā)的技術(shù)使用了離心柱及專(zhuān)門(mén)的緩沖液來(lái)從預過(guò)濾的生物液體中純化exosome;可處理高達4 ml的血漿或血清。對于細胞培養上清,經(jīng)試驗驗證可從高達32 ml的樣品中成功提取外泌小體(4次離心柱上樣步驟)。不過(guò),上清中的囊泡濃度非常依賴(lài)于細胞類(lèi)型及培養條件;因此我們建議,對于未經(jīng)過(guò)該試劑盒測試樣品材料,起始上清體積不要超過(guò)16 ml。更高的樣品體積可能導致囊泡的回收率降低。實(shí)驗流程非??焖僖恢?,非常適用于exosome及其他細胞外囊泡的功能性分析。除囊泡之外的懸浮顆粒絕大部分可在結合及清洗步驟中被去除,這種顆粒包括了大體積的蛋白復合物,其在血漿及血清中含量很高。
Procedure
提取細胞外囊泡的總流程僅需要25分鐘。將預先過(guò)濾過(guò)的血漿、血清或細胞培養上清(去除了尺寸大于0.8 μm的顆粒)與Buffer XBP進(jìn)行混合并結合在exoEasy膜親和離心柱上。對結合的外泌小體使用Buffer XWP進(jìn)行清洗,并隨后使用400 µl Buffer XE(主要含無(wú)機鹽的水緩沖液)進(jìn)行洗脫,隨后即可用于物理或生化分析。對于特定應用,如生物檢測等,可能需要進(jìn)行額外的濃縮或緩沖液置換步驟。此步驟可通過(guò)孔徑尺寸為100 kDa或更小的超濾方法來(lái)實(shí)現。
Applications
exoEasy Kit非常適合于從血漿、血清、細胞培養上清及其他生物液體中提取微囊泡。提取獲得的囊泡可用于如下應用進(jìn)行分析:
•物理性質(zhì)分析(例如,NTA,TRPS)
•電子顯微鏡
•提取并分析DNA、RNA*、蛋白質(zhì)、脂類(lèi)及其他成分
•流式細胞術(shù)
•抗體或熒光染料標記
•受體細胞的攝取
*如需提取囊泡RNA,我們推薦使用exoRNeasy試劑盒。
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