蛋白分析鑒定整體解決方案
目前對于蛋白的分析和鑒定,常用的經(jīng)典方法有聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE),蛋白免疫印跡(Western Blot)Elisa等。
聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)經(jīng)常用于提純過(guò)程中純度的檢測,純化的蛋白通常在SDS電泳上應只有一條帶,但如果蛋白質(zhì)是由于不同的亞基組成的,他在電泳中可能會(huì )形成分別對應于各個(gè)亞基的幾條帶,SDS-PAGE具有比較高的靈敏度,一般只需要不到微克量級的蛋白質(zhì),而且通過(guò)電泳還可以同時(shí)得到關(guān)于分子量的情況,這些信息對于了解未知蛋白及設計提純過(guò)程都是非常重要。
蛋白免疫印跡(Western Blot)是將電泳分離后的細胞或組織中蛋白質(zhì)從凝膠轉移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測技術(shù),現已廣泛應用于基因在蛋白水平的表達研究、抗體活性檢測和疾病早期診斷等多個(gè)方面。
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